Gel DNA Purification Kit

华体会网络不稳定 纯化回收试剂盒

华体会网络不稳定 DNA回收试剂盒 核酸提取

目录号:43011

产品内容：

自备试剂：

无水乙醇

保存条件：

室温（15~25℃）

产品简介：

本试剂盒适用于从TAE 或 TBE 华体会网络不稳定 中回收 DNA 片段，使用本产品可回收 100bp-10kb 大小的DNA 片段，回收率可达 85%-95%。该试剂盒操作简便，得到的 DNA 片段可用于酶切、连接、测序等实验。

产品特点：

1.快速：步骤少，操作简便，整个操作仅需15 分钟。

2.高效：每个离心吸附柱可吸附10 ug以上的DNA片段，回收效率在85%以上。

注意事项：

1. BufferBL 的加入能够改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和稳定性，消除高温潮湿或其他不良环境因素对吸附柱造成的影响。收到货后2 个月内，不用做柱平衡。

2.使用前请先检查Buffer BL、Buffer DB是否出现浑浊，如有混浊现象，可在37℃水浴中加热几分钟，即可恢复澄清。

3.切胶时，紫外照射时间应尽量短，以免对DNA造成损伤。

4.回收率与初始DNA量和洗脱体积有关，初始量越少、洗脱体积越小，回收率越低。

操作步骤

第一次使用前，请先在BufferWB中加入无水乙醇，并打对勾标记，加入体积请参照瓶上的标签。

从华体会网络不稳定 中回收DNA片段

1. 柱平衡：向吸附柱中（吸附柱放入收集管中）加入100 ulBuffer BL，12,000 rpm离心1 min，弃滤液，将吸附柱重新放回收集管中。（请使用当天处理过的柱子）

2.切胶：在长波紫外灯下，用干净刀片将目的DNA条带切下，尽量切除不含DNA的凝胶。

3.称重：将切下的含有目的DNA条带的凝胶，放入1.5ml离心管中，称取凝胶重量（去除空管重量）。如果凝胶重量为100mg，其体积可视为100ul。

4.溶胶：加入3倍体积Buffer DB，56℃水浴，直到凝胶wan全溶解，期间颠倒混匀 2 次加速溶胶。

（如果凝胶浓度大于2%，应加入6倍体积BufferDB。对于回收<100bp的小片段，可在凝胶wan全溶解后，再加入1.5倍胶块体积的异丙醇以提高回收率。）

5.吸附：待溶液冷却至室温后加入吸附柱中，室温静置1 min，然后12,000 rpm离心1 min，弃滤液。

（如果总体积超过750ul，可分2次将溶液加入同一离心吸附柱中）

6.漂洗：加入600ul漂洗液BufferWB，12,000rpm离心1min，弃滤液。

7.二次漂洗：重复操作步骤6。

8.干燥：将吸附柱放回收集管中，12,000 rpm离心2 min，甩干膜上残留的乙醇，防止其抑制下游反应。

9.回收：将离心吸附柱置于一个新的1.5ml离心管中，在吸附柱中央加入30~50ul洗脱液BufferEB，室温放置2 min，12,000 rpm离心1 min收集DNA 片段。

（注意：为增加回收效率，可将洗脱液在65℃预热，也可将得到的溶液重新加入到离心管中，室温放置2 min，再次离心收集。）

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